Наночастицы, содержащие пептид из пчелиного яда мелиттин, способны разрушать вирус иммунодефицита человека, оставляя при этом окружающие ткани нетронутыми.

Об этом сообщают в мартовском выпуске издания «Antiviral Therapy» ученые из Школы медицины при Университете Вашингтона.

Исследователи говорят, что их открытие - это большой шаг для создания нового вагинального геля, предназначенного для профилактики распространения ВИЧ.

Доктор Джошуа Худ, сотрудник университета, заявляет: «Мы надеемся, что в местах, особенно неблагополучных в отношении ВИЧ, люди смогут использовать этот гель для прекращения распространения эпидемии».

Мелиттин уничтожает вирусы и некоторые раковые клетки.

Мелиттин - это мощный белковый токсин, который содержится только в пчелином яде. Он способен пробивать дыры в защитной оболочке, которая окружает ВИЧ и некоторые другие вирусы. Свободный мелиттин в достаточно больших количествах может стать мощным оружием против различных вирусных инфекций, и не только.

Главный автор исследования доктор Сэмюель Уиклайн, профессор биомедицинских наук, продемонстрировал наночастицы, загруженные мелиттином, которые обладают противораковыми свойствами. Еще в 2004 году хорватские ученые сообщали в журнале «Journal of the Science of Food and Agriculture» о том, что продукты пчеловодства, включая пчелиный яд, могут применяться для лечения и профилактики рака. Данные о противораковых свойствах пчелиного яда отнюдь не новые, но теперь ученые раскрыли секрет этого лекарства на молекулярном уровне.

Нормальные клетки при лечении остаются интактными - ученые показали, что наночастицы с мелиттином не повреждают клеточную оболочку здоровых клеток. Для этого наночастицы были оборудованы специальными молекулярными «бамперами», которые при встрече с нормальной клеткой (размер ее гораздо больше вирусной частицы) не дают наночастице прикрепиться к ее оболочке.

ВИЧ - это частица, которая несравненно меньше любой клетки человека, поэтому «бамперы» не ограничивают действие наночастиц на вирус. Когда вирус приближается к наночастице, он проходит между ограничителями и вступает в контакт с токсином, который разрушает ВИЧ.

Доктор Худ поясняет: «Мелиттин на наночастицах сливается с вирусной оболочкой, образует маленькие поры, которые приводят к разрыву и потере вирусной оболочки».

В то время как большинство противовирусных препаратов угнетают способность вируса к репликации, это средство непосредственно атакует жизненно важную часть вируса. Проблема с традиционными ингибиторами репликации вируса состоит в том, что они не останавливают начало инфекционного процесса. А некоторые штаммы ВИЧ уже выработали устойчивость к традиционной терапии, поэтому ART не останавливает их размножение.

Доктор Худ по этому поводу говорит: «Мы научились атаковать ту часть вируса, которая у разных штаммов остается практически неизменной. Теоретически, у вируса нет путей адаптации к новому средству. Он не может радикально изменить структуру мембраны, защищающей его генетический материал».

Наночастицы с мелиттином могут не только предотвращать, но и лечить ВИЧ-инфекцию. Доктор Худ верит, что эти наночастицы могут применяться для двух целей:

Профилактика распространения ВИЧ (вагинальный гель).
. Лечение ВИЧ/СПИД, в том числе резистентной инфекции (инъекции).

Считается, что такие частицы после введения в системный кровоток способны за некоторое время очистить кровь больного от вируса. Но для получения доказательств нужно провести клинические испытания.

Худ признался, что базовые частицы, которые использовались в эксперименте, были разработаны много лет назад как искусственный компонент крови. Эти наночастицы не очень хорошо выполняли задачи по доставке кислорода. Но было установлено, что частицы способны долгое время циркулировать в крови человека, не нанося организму никакого вреда. Таким образом, эти структуры - великолепная платформа для доставки различных антибактериальных и противовирусных агентов.

Мелиттин, как оказалось, атакует не только двухслойную мембрану печально известного ретровируса. Он способен разрушать защитную оболочку вирусов гепатита типа В и С, что открывает перед учеными еще одно широкое поле для исследований.

Перспективный вагинальный гель будет иметь и спермицидные свойства, что делает его еще и контрацептивным препаратом. Идеальное средство многогранного действия для отсталых стран, где есть большие проблемы и с ВИЧ, и с контрацепцией. Тем не менее, исследование доктора Худа не будет изучать контрацептивный эффект.

Доктор Худ говорит: «Сейчас мы рассматриваем этот гель как смелый вариант для пар, где один из партнеров ВИЧ-положительный, но они хотят заниматься сексом и иметь детей. Сами по себе наночастицы с мелиттином абсолютно безвредны для сперматозоидов, поэтому можно создать гель с защитой от ВИЧ, но без контрацептивного эффекта».

Исследование доктора Худа пока что проводилось на лабораторных клетках в искусственной среде. Тем не менее, наночастицы легко производить, и уже сейчас есть возможность поставить достаточное количество препарата для клинических испытаний на людях.

Константин Моканов

Мелитин, полипептид со свойствами ПАВ, способны разрушать вирус иммунодефицита человека, не причиняя при этом вреда окружающим живым клеткам. Об этом сообщают ученые из Вашингтонского университета (США) со страниц мартовского номера журнала «Antiviral Therapy».

Исследователи считают, что ими совершен прорыв в деле создания вагинального геля, который предотвратит заражение женщин вирусом, иногда вызывающим смертоносный СПИД. Такой гель обещает быть востребован в тех местах планеты, где ВИЧ «чувствует себя» особенно хорошо, например, на юге Африки.

Ядовитый мелитин способен (в определенных концентрациях) разрушать защитные оболочки различных микробов и вирусов, в т.ч. ВИЧ, образуя в них каналы. Ранее было установлено, что наночастицы, наполненные полипептидом пчелиного токсина, обладают противораковыми свойствами, т.е. могут убивать опухолевые клетки, не желающие погибать самостоятельно. Еще в 2004 году ученые из Хорватии научились лечить рак с помощью продуктов, выделенных из яда пчелы.

Как же мелитину удается перфорировать вирусные оболочки, не затрагивая мембраны здоровых клеток? Дело в наночастицах, поверхность которых снабжена своеобразными «бамперами». Когда частицы вступают в контакт с нормальными клетками, они от них отталкиваются. В свою очередь, ВИЧ гораздо меньше в размерах, чем наночастицы, поэтому он застревает между «бамперами» на поверхности агента, где и подвергается разрушительному воздействию токсина, фактически «раздевающего» вирус.

Большинство антиретровирусных лекарств подавляют способность вируса к размножению внутри инфицированных клеток. Но сам ВИЧ при этом не перестает быть собой - зараза просто «дремлет». А некоторые штаммы вируса вообще нашли способ не поддаваться препаратам, ингибирующих репликацию патогена.

Мелитин же разрушает ВИЧ физически. Теоретически, к этому адаптироваться невозможно - без двуслойной липидной мембраны вирус не жилец. Если экспериментальные наночастицы ввести больному в кровь, то они должны очистить ее от ВИЧ. Кстати, и разрабатывались данные чудеса технологии изначально для того, чтобы получить искусственную кровь, однако с доставкой кислорода частицы справились плохо. Одно хорошо - то, что организм их не отторгает и наночастицы могут циркулировать в кровотоке продолжительное время. То есть, с их помощью можно исцелять не только от ВИЧ, а и от других инфекций, вызываемых патогенами с малыми размерами - например от . Также гель с наночастицами потенциально способен убивать сперматозоиды, используясь в качестве противозачаточного средства.

27-летнюю Элли Лобел укусил клещ, и она заразилась болезнью Лайма. Годы спустя женщина, уставшая бороться с ужасными последствиями болезни, решила сдаться.

Болезнь Лайма вызывают бактерии Borreliaburgdorferi , попадающие в организм при укусах клещей. Каждый год в США регистрируют около 300 000 новых случаев заражения. Практически никто из заболевших не умирает, и большинство из них выздоравливает при условии своевременного оказания медицинской помощи. Лечение антибиотиками убивает бактерии до того, как они успеют поразить сердце, суставы и нервную систему.

Но весной 1996 г. Элли не подозревала, что нужно обратить внимание на характерную реакцию в виде сыпи - женщина подумала, что ее укусил паук. После этого в течение трех месяцев она страдала от гриппоподобных симптомов и страшных болей, мигрировавших по разным частям тела. Элли - здоровая, активная мать троих детей - не знала, как вылечиться от этого странного заболевания. Она превратилась в инвалида. "Я едва могла самостоятельно оторвать голову от подушки", - вспоминает женщина.

Первый врач, к которому она обратилась, диагностировал вирусное заболевание и успокоил ее, что оно пройдет само собой. То же самое сказал и второй доктор. Время шло, Элли ходила по докторам, и каждый раз ей ставили новый диагноз — рассеянный склероз, волчанка, ревматоидный артрит, фибромиалгия. Никто не догадался, что организм женщины поражен бактериями Borrelia. Поставить правильный диагноз смогли лишь через год с лишним после заражения, но к тому времени было уже поздно.

"Я проходила один за другим разнообразные курсы лечения", - говорит Элли. Состояние ее неуклонно ухудшалось. Она не могла сама выбраться из кровати, была вынуждена пользоваться инвалидным креслом, замечала за собой потерю краткосрочной памяти и снижение интеллекта: "Иногда мне на короткое время становилось лучше, но потом я снова погружалась в этот кошмар — и с каждым разом рецидивы становились все более жестокими".

После 15 лет такой жизни Элли сдалась. "Ничто мне больше не помогало, и никто не мог мне ничего посоветовать, - говорит она. - Мне было уже все равно, доживу ли я до следующего дня рождения. Я решила, что с меня хватит. Мне просто хотелось прекратить это мучение".

Элли переехала в Калифорнию, чтобы умереть там. И чуть не умерла.

Меньше чем через неделю после переезда на нее напал рой африканизированных пчел — гибридных пчел, отличающихся крупными размерами и особой агрессивностью.

Пчелы-спасители

До этого инцидента Элли успела провести в Калифорнии всего три дня. "Я хотела подышать напоследок свежим воздухом, подставить лицо солнечным лучам и услышать пение птиц, - говорит она. - Я знала, что умру, прикованная к постели, через три-четыре месяца. Состояние мое было довольно депрессивным".

К тому времени Элли уже с трудом держалась на ногах без посторонней помощи. Она наняла мужчину-сиделку, который помогал ей медленно передвигаться по сельским дорогам неподалеку от ее нового дома в Уилдомаре, который должен был стать ее последним пристанищем.

До этого случая Элли смертельно боялась пчел

Элли остановилась у разрушенной стены, когда появилась первая пчела. Насекомое, по ее воспоминаниям, укусило ее прямо в голову. "И внезапно налетел целый рой пчел", - говорит она.

Ее спутник убежал. Но Элли не могла ни бежать, ни даже идти самостоятельно: "Пчелы запутывались у меня в волосах, я ничего не слышала, кроме их жужжания. И тогда я подумала — вот сейчас я и умру, прямо здесь".

Элли входит в относительно небольшую группу людей — по разным оценкам, от 1% до 7% населения Земли, - с очень сильной аллергией на пчелиный яд. Когда ей было два года, от укуса пчелы у нее развилась анафилаксия — резкая реакция иммунной системы, которая может выражаться в отеках, тошноте и сужении дыхательных путей. Тогда Элли чуть не умерла - у нее произошла остановка дыхания, и ее пришлось оживлять при помощи дефибриллятора. После того случая мать Элли внушила ей страх пчел, чтобы она больше никогда не попадала в подобные опасные для жизни ситуации.

Мощный яд

Пчелы, а также некоторые другие виды насекомых отряда перепончатокрылых, такие как муравьи и осы, обладают мощным оружием — многокомпонентным ядом. Возможно, наиболее важный из этих компонентов — крохотный пептид, построенный из 26 аминокислот, известный как мелитин, который и вызывает чувство жжения при пчелином укусе.

Когда организм подвергается воздействию высоких температур, клетки выделяют воспалительные соединения, активирующие в рецепторных нейронах особые каналы, известные как рецепторы TRPV1. В результате нейроны посылают мозгу сигнал о том, что его владелец горит. Мелитин воздействует на иные ферменты в организме, которые, действуя точно так же, как и воспалительные соединения, тоже активируют рецепторы TRPV1.

"Первые пять-десять укусов я еще успела почувствовать, - вспоминает Элли. - Все, что я слышала, - это их оглушительное жужжание; я чувствовала, как они жалят мне голову, лицо, шею".

Она продолжает: "Я обмякла, подняла руки и закрыла ими лицо, потому что не хотела, чтобы пчелы жалили меня в глаза… А потом пчелы исчезли".

Элли уверена, что пчелиный яд спас ей жизнь

Когда рой наконец улетел, мужчина, присматривавший за Элли, попытался отвезти ее в больницу, но она отказалась. "Это Бог наконец решил избавить меня от мучений, - сказала она ему. - Я просто приму его дар".

"Я заперлась в своей комнате и попросила его прийти на следующее утро забрать мое тело".

Но Элли не умерла — ни в тот день, ни через четыре месяца.

"Я не могу поверить в то, что произошло три года назад, не могу поверить в мое выздоровление, - говорит она. - Но все анализы это подтверждают, и я чувствую себя такой здоровой!"

Элли уверена в том, что пчелиный яд спас ей жизнь.

То, что содержащиеся в ядах животного происхождения токсины, причиняющие человеку вред, могут также использоваться и для лечения, известно уже давно. В Азии пчелиный яд столетиями применяется в лекарственных целях. В традиционной китайской медицине яд скорпиона считается мощным лекарственным средством и используется для лечения широкого круга заболеваний — от экземы до эпилепсии. Говорят, что понтийский царь Митридат VI, могущественный враг Римской империи (известный также тем, что с детства изучал ядовитые растения), избежал смерти от тяжелого ранения на поле боя, остановив кровотечение при помощи яда степной гадюки.

"За миллионы лет эволюции насекомые, эти крохотные инженеры-химики, создали бесконечное количество молекул, действующих на разные отделы нашей нервной системы, - говорит Кен Уинкел, директор отдела по исследованию ядов Университета Мельбурна. - Идея о том, чтобы лечить заболевания нервной системы с помощью этих мощных нейротоксинов, муссируется уже долгое время. Но пока у нас недостаточно знаний для того, чтобы делать это эффективно и безопасно для пациента".

По словам Элли, чтобы собрать один грамм яда, необходимо, чтобы по пластине прошло 10000 пчел

Несмотря на обилие исторических свидетельств в пользу использования животных ядов в лечебных целях, в современной медицинской терапии их применение оставалось минимальным вплоть до начала XXI века, говорит исследователь Гленн Кинг из Квинслендского университета в австралийском Брисбене. В 1997 г., в то время когда Элли металась по врачам, Кинг раскладывал на компоненты яд смертельно опасного австралийского воронкового паука. Сейчас он является одним из лидеров в исследованиях фармакологических свойств ядов животного происхождения.

Команде Кинга первой удалось разложить яд паука на компоненты при помощи метода высокоэффективной жидкостной хроматографии. "Я был потрясен результатами, - говорит Кинг. - Никто до нас всерьез не обращал внимания на эту фармакологическую золотую жилу. Мы смогли разложить яд на сотни индивидуальных пептидов".

В течение XX века в медицинской литературе периодически появлялись предложения использовать животные яды при лечении различных заболеваний. Испытания показывали, что такие яды помогают бороться с раком, убивают бактерии и даже служат мощными болеутоляющими средствами — правда, многие эксперименты ограничивались подопытными животными. На момент написания этой статьи лишь шесть препаратов на основе ядов животного происхождения были разрешены к медицинскому применению американским Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (еще один препарат - Балтродибин, созданный на основе яда копьеголовой змеи — такого разрешения не имеет, но продается за пределами США в качестве кровоостанавливающего средства во время проведения хирургических операций).

Чем больше мы узнаем о ядах, причиняющих ужасный вред здоровью человека, тем больше понимаем, насколько полезными они могут оказаться с медицинской точки зрения — например, как в случае мелитина в яде пчелы.

Действие на молекулярном уровне

Мелитин способен не только причинять боль. При правильной дозировке он пробивает отверстия в защитных мембранах клеток, из-за чего последние взрываются. В малых дозах мелитин связывается с мембранами, активируя ферменты, расщепляющие липиды. Эти ферменты имитируют воспалительный процесс, вызванный воздействием повышенной температуры. Но в более высокой концентрации и в определенных условиях молекулы мелитина группируются в кольца. Они создают в клеточных мембранах широкие поры, ослабляя защитный барьер клетки и заставляя всю клетку раздуваться и лопаться, как воздушный шарик.

Мелитин легко справляется с разными бактериями и грибками

Благодаря этому свойству мелитин действует как мощное антимикробное средство, легко справляясь с разнообразными бактериями и грибками. Впрочем, ученые полагают, что этим полезные качества мелитина не исчерпываются. Они надеются, что при помощью него можно будет бороться с такими заболеваниями, как ВИЧ, рак, артрит и рассеянные склероз.

Например, исследователи из Школы медицины при Университете Вашингтона в Сент-Луисе, штат Миссури, обнаружили, что мелитин способен разрушать защитную мембрану вируса иммунодефицита человека, не повреждая при этом клетки организма. При этом у вируса нет шанса выработать сопротивляемость данной угрозе. "Мелитин уничтожает присущее ВИЧ физическое свойство, - заявил прессе ведущий автор работы по данной тематике Джошуа Худ. - В теории вирус никак не сможет приспособиться к такому сценарию. Защитная оболочка ему жизненно необходима". Поначалу средство, над которым работают в Миссури, разрабатывалось как профилактический вагинальный гель, но сейчас ученые надеются, что наночастицы, "заряженные" мелитином, в будущем можно будет вводить в кровеносную систему пациентов в виде инъекций, таким образом очищая организм от инфекции.

Убийца бактерий

Но действительно ли пчелиный яд вылечил Элли от болезни Лайма? Женщина согласна с тем, что ее история звучит не вполне правдоподобно. "Если бы кто-нибудь предложил мне испытать на себе укусы пчел, чтобы выздороветь, я бы сочла этого человека сумасшедшим", - говорит Элли. Однако сейчас у нее нет никаких сомнений в том, что именно яд помог ей исцелиться.

После того, как ее искусали, Элли смотрела на часы, ожидая появления симптомов анафилаксии, но те всё не появлялись. Вместо этого спустя три часа начались мучительные боли во всем теле. Еще до заболевания Элли получила естественнонаучное образование. Она полагает, что ее боли были вызваны не аллергической реакцией на пчелиный яд, а аллергическим процессом на токсины умирающих бактерий, известным как реакция Яриша-Гексгеймера. Подобный синдром наблюдается в процессе лечения тяжело протекающего сифилиса. Существует версия, что определенные виды бактерий, погибая, выделяют токсичные вещества, которые, в свою очередь, вызывают лихорадку, сыпь и другие симптомы.

Три дня Элли мучилась от боли. А потом боль исчезла.

"Все эти годы я жила в постоянном состоянии полукомы из-за воспаления мозга, вызванного болезнью Лайма, - говорит она. - Но внезапно туман в моей голове рассеялся. Я осознала, что снова могу ясно мыслить - впервые за много лет".

Элли некоторое время применяла апитерапию - лечение с помощью живых пчел

Теперь, когда ее сознание прояснилось, Элли задалась вопросом, что же с ней произошло. Она сделала то, что сделал бы любой на ее месте — стала искать информацию в сети. К ее разочарованию, поиски не принесли существенных результатов. Однако ей удалось найти ссылку на небольшое исследование, проведенное в 1997 г. учеными из института Rocky Mountain Laboratories в штате Монтана, которые обнаружили, что мелитин убивает бактерии Borrelia . Исследователи подвергали клеточные культуры воздействию чистого мелитина и пришли к выводу, что вещество полностью блокирует рост Borrelia . Проведя более подробное исследование, они выяснили, что вскоре после контакта с мелитином бактерию фактически парализует — она теряет способность двигаться, а в это время пептид воздействует на ее внешнюю мембрану. Еще через некоторое время мембрана начинает распадаться, и бактерия погибает.

Вдохновленная собственным опытом и выводами исследователей, Элли решила попробовать апитерапию — вид лечения с применением живых пчел и продуктов пчеловодства. Ее интересовали именно живые пчелы.

В своей квартире Элли устроила специальный домик для пчел. Она не выращивает их сама — заказывает партию по почте раз в неделю. Элли берет пчелу пинцетом и осторожно прижимает ее к тому или иному участку тела. "Иногда приходится слегка постучать им по жалу, но обычно они охотно жалят", - говорит она.

Элли начала с 10 пчелиных укусов в день по три раза в неделю — по понедельникам, средам и пятницам. Прошло три года, и после несчетного количества укусов Элли, похоже, полностью выздоровела. Она постепенно снижает количество укусов и частоту процедуры — за последние восемь месяцев она заставила пчел ужалить себя лишь трижды (причем один раз — в попытке уменьшить отек, вызванный переломом, а не из-за симптомов, вызванных болезнью Лайма). Элли по-прежнему держит дома пчел на всякий случай, но в последний год в основном обходится без их помощи.

Новые исследования

Редкие случаи, подобные тому, что произошел с Элли, служат нам напоминанием о мощном потенциале, которым обладают животные яды. Однако воплощение передаваемых из уст в уста легенд об исцелениях в реальные фармацевтические препараты может оказаться очень длительным и непростым процессом. "Между открытием фармакологических свойств вещества и получением патента на медицинский препарат на его основе порой проходит до 10 лет, - говорит Кинг. - И на каждый успех приходится с десяток неудач".

После исследования 1997 г. никто углубленно не изучал пчелиный яд как возможное средство от болезни Лайма - пока этим не занялась Элли.

Яд пчел стоит "дороже золота"

Она договорилась о сотрудничестве с пчеловодческим хозяйством, которое собирает пчелиный яд при помощи электрифицированной стеклянной пластины, размещенной у входа в ульи — пчелы проходят по пластине по пути из улья и назад, а безвредные для них электрические токи стимулируют выделения яда из брюшек. На стекле оседают крохотные капельки яда, которые затем собираются. По словам Элли, чтобы собрать один грамм яда, необходимо, чтобы по пластине прошло 10 000 пчел (по данным других источников, таких как Продовольственная и сельскохозяйственная организация ООН, один грамм яда содержится в 1 миллионе пчелиных укусов). Она подчеркивает, что данный метод сбора не вредит здоровью пчел.

Элли отправляет часть купленного яда - который, по ее словам, стоит "дороже золота" из-за высокой стоимости гуманного метода сбора - на адрес Эвы Сапи, доцента биологии и исследований окружающей среды в Университете Нью-Хевена, которая изучает болезнь Лайма.

Работа Сапи по изучению влияния пчелиного яда на бактерии Лайма продолжается, и результаты пока не опубликованы, хотя она говорит, что выводы, полученные на предварительном этапе одним из ее студентов, "весьма обнадеживают". Бактерии Borellia могут менять форму в организме, поэтому их так трудно уничтожить. Сапи выяснила, что традиционные антибиотики на самом деле не убивают бактерии, а просто заставляют их мутировать в более латентную форму. Как только пациент прекращает прием антибиотиков, бактерии снова становятся активными. В своей лаборатории Сапи проводит испытания различных пчелиных ядов на всех формах, которые способна принимать бактерия, и пока исследования показывают, что мелитин эффективен во всех случаях.

Дальше нужно будет выяснить, именно ли мелитин оказывает такое действие на бактерии, или же в пчелином яде содержатся и другие вещества, участвующие в этом процессе. "Кроме того, мы хотим увидеть при помощи изображений высокого разрешения, что именно происходит при контакте пчелиного яда с Borellia" , - говорит исследователь.

До сих пор достоверно не известно, убил ли пчелиный яд бактерии болезни или просто стимулировал иммунную систему Элли

Сапи подчеркивает, что, прежде чем будет принято решение о целесообразности клинического применения мелитина, необходимо собрать больше данных. "Прежде чем приступить к исследованиям на людях, нужно провести некоторый объем испытаний на животных, - говорит она. - Все-таки речь идет о яде". Кроме того, до сих пор достоверно не известно, почему именно пчелиный яд помог Элли, в том числе из-за того, что этиология симптомов, которые та испытывала при излечении, остается неясной. "Оказался ли пчелиный яд эффективным в ее случае, потому что он убил Borellia , или потому что стимулировал ее иммунную систему?" - спрашивает Сапи. Ответа на этот вопрос пока нет.

Как бы то ни было, животные яды могут оказаться прекрасными источниками медицинских препаратов для лечения тяжелых неврологических заболеваний, поскольку многие из них действуют именно на нервную систему жертвы. "В этой сфере у нас пока нет действенных лекарств, - говорит Винкел. - Тем временем рядом с нами живут крохотные живые фабрики по производству бесконечного числа удивительных веществ…"

Никто точно не знает, сколько ядовитых видов животных обитает на Земле. Но известно о существовании ядовитых медуз, улиток, насекомых и даже приматов. "Когда меня просят подсказать наиболее убедительный аргумент в пользу необходимости сохранения живой природы, я отвечаю, что попытаться апеллировать к ее красоте и девственности — самый проигрышный вариант", - говорит доктор Брайан Фрай из Университета Квинсленда. Вместо этого, по его словам, нужно подчеркивать, что дикая природа обладает гигантским — и пока до конца не изученным - потенциалом, который может пригодиться человечеству: "Мы говорим о ресурсе, о деньгах. Поэтому охрана природы путем ее коммерциализации — единственный разумный подход".

Элли полностью разделяет эту мысль. "Нам предстоит провести еще очень много исследований природных ядов, - говорит она. - Мы должны посмотреть, что еще природа может предложить нам в помощь".

• Апитерапия. / Хисматуллина Н.3. - Пермь: Мобиле, 2005. - 296 с.
• Руководсто по апитерапии (лечение пчелиным ядом, мёдом, прополисом, цветочной пыльцой и другими продуктами пчеловодства) для врачей, студентов медицинских вузов и пчеловодов / Э. А. Лудянский. – Вологда: [ПФ "Полиграфист"], 1994. – 462 с.

2 Химический состав пчелиного яда по книге Хисматуллиной Н.З.

2.1 Состав пчелиного яда

Высушенный пчелиный яд представляет собой многокомпонентную смесь из неорганических и органических веществ. Органические вещества яда:

• углеводы;
• жиры;
• белки;
• пептиды;
• аминокислоты;
• биогенные амины;
• ароматические и алифатические соединения и т. д.

Если высушенный яд составляет 30-45% от нативного секрета, то основная часть сухого вещества яда представлена белками и пептидами - около 80% минеральных веществ, остающихся после сжигания яда при 500-600°C, составляют 2-4% сухой массы яда. Состав пчелиного яда по данным разных источников представлен в таблице.

Название Молекулярная
масса Количество
аминокислотных
остатков 4÷8 88
130
130 1÷3 41000 10÷12 15800 129 1 22000 1 55000 0.6 170000 40÷50 120000 (тетрамер) рН выше 9
2840 (мономер) в растворе 26 0.01 1÷3 2036 18 1÷2 2593 22 0.5÷2 3000 25 1 2500 21 1÷3 600 1940 11000 15800, 8500 13÷15 менее 600 0.5÷2 111 0.2÷1 189.7 0.1÷0.5 169 176 2 180 52 700 1 700 43.6 7.1 13.6 2.6 33.1

Содержание в яде, %
1.Ферромоны (летучие вещества)
Этилацетат Изоамилацетат n-амилацетат и др. (всего идентифицировано больше 20 летучих составляющих)
2.Белки (ферменты)
Гиауронидаза
Фосфолипаза А2
Мезофосфолипаза
Кислая фосфатаза (фосфомоноэстераза)
Альфа-глюкозидаза
3.Пептиды (полипептиды)
Мелиттин
Мелиттин F
Апамин
МСД (пептид 401)
Секапин
Тертиапин
Прокамины
Кардиопеп
Адолапин
Протеазные ингибиторы
Другие пептиды
4.Биологически активные амины
Гистамин
Дофамин
Норадреналин
Серотонин
5.Сахара
Глюкоза Фруктоза
6.Липиды
Фосфолипиды
7.Аминокислоты
Свободные аминокислоты
8.Минеральный состав (из 30-45% сухого остатка и 2-4% золы)
Углерод
Водород
Азот
Азот
Фосфор Магний Кальций Медь и др.

Химический состав яда - это результат биохимической эволюции соединений, обладающих выраженными биологическими свойствами. Ингредиенты яда имеют строгую специализацию, но действуют синергично, дополняя и усиливая друг друга.

Феромоны - биологически активные вещества, выделяемые пчелами в окружающую среду и являющиеся средством внутривидовой сигнализации. Это сигнальные вещества, имеющие большое значение, в первую очередь, для защитного поведения пчел. Различают феромоны половые, тревоги, сбора и т. д.

Токсины пчелиного яда (пептиды, полипептиды) - низкомолекулярные белковые соединения, структура которых уникальна, они видоспецифичны и предназначены для токсического действия.

Ферменты , (энзимы) которые содержатся в яде пчел, могут рассматриваться как агенты, повреждающие тканевые структуры путем энзиматического гидролиза. Основными энзимами, входящими в состав пчелиного яда и определяющими ряд его важнейших эффектов, являются:

• фосфолипаза А2;
• гиалуронидаза;
• кислая фосфатаза;
• а-глюкозидаза;
• лизофосфолипаза (фосфолипаза В - устаревшее название, современное - фосфолипаза L);

2.2 Свойства компонентов пчелиного яда

Биохимические Фармакологические Токсические Различная степень деструкции клеточных мембран эритроцитов, базофилов, тучных клеток и мембран лизосом. Цитолиз базофилов и тучных клеток сопровождается выделением серотонина, брадикинина и гистамина. Усиливает синтез из арахидоновои кислоты простагландинов различных классов. Повышает тонус гладких мышц (главным образом желудочно - кишечного тракта и поперечно-полосатых мышц), что связано с выделением гистамина из тучных клеток и базофилов. Уменьшает активность тромбопластина. Стимулирует продукцию адренокортикотропного гормона (АКТГ). Связывается с биологически активными клеточными веществами. Угнетает иммунный ответ посредством стимуляции гормонов надпочечников. Ограничивает доступ кислорода к тканям, обеспечивает реализацию радиопротекторного действия при лучевом поражении. Снижает артериальное давление. Противовоспалительные свойства. Оказывает сосудорасширяющее действие, предохраняет сосуды от атеросклеротических изменении. Терапевтические дозы повышают тонус. Антикоагулянтное действие. При повышении выделения глюкокортико стероидов корой надпочечников - противовоспалительное действие. Антибактериальное действие , угнетает рост грамположительных бактерий. Противоревматические свойства. Высокие дозы вызывают блокаду симпатических ганглиев (понижение артериального давления). Повышенные дозы нарушают неиромышечную передачу и вызывают противополож. эффект. Местная воспалительная реакция. Большие дозы вызывают гемолитическую анемию и появление гемоглобина в моче, спазм бронхов. Вызывает дегрануляцию только тучных клеток с высвобождением гистамина, серотонина и гепарина. Механизм выделения гистамина принципиально отличается от соответствующего процесса при аллергических реакциях немедленного типа. Стимулирует АКТГ - синтетическую функцию гипофиза Гипотензивное действие, повышение проницаемости стенки капилляров. Противовоспалительный эффект Аллергических свойств не обнаружено. Менее токсичный ингредиент пчелиного яда Обладает эндорфиноподобной активностью, нарушает межеинаптическую передачу. Угнетает циклооксигеназу и липоксигеназу, уменьшает и замедляет биосинтез простагландинов, напрямую влияет на воспалительный очаг Анальгетический и противовоспалительный эффекты. Сочетание центрального и периферического анальгетического эффекта Низкая аллергенность Умеренное седативное и гипотермическое действие Исключительно низкая токсичность Ингибирует Са2+- связывающий белок кальмодулин, регулирующий активность большого числа Са2+-зависимых ферментов Выраженное пресинаптическое действие на нервно-мышечный аппарат Угнетают действие протеолитических ферментов железистого секрета пчел, крови и тканей ужаленного организма, сохраняют активность белково - пептидного комплекса яда. Угнетают активность трипсина Обладают противовоспалительными свойствами , которые обусловлены угнетением некоторых протеолитических ферментов, участвующих в развитии воспалительного процесса, задерживают передвижение некоторых видов лейкоцитов Нетоксичны Воздействует на течение сердечной недостаточности Антиаритмическое действие, близкое по выраженности к β -адреноблокаторам Воздействует на структурные фосфолипиды, (фосфоглицериды), входящие в состав биологических мембран, митохондрий, нарушает клеточные функции. Образует из лецитина биологически активный лизолецитин, угнетает деятельность тканевых дегидрогеназ и тромбокиназ, тормозит окислительное фосфолирование, обладает нейротропными свойствами, нарушает процесс высвобождения медиаторов из пресинаптических терминалей, ингибирует тепловую коагуляцию яичного желтка Понижение свертываемости крови под влиянием пчелиного яда (гемолитическая активность). Гидролитическая функция и трансацилазная активность Структурный яд, антигенный и аллергенный субстрат, усиливает антикоагулянтное действие мелиттина Вызывает распад гиалуроновой кислоты, которая определяет барьерные функции основного межклеточного вещества. Разрушает ткани и способствует распространению в организме активных начал яда из-за повышенной проницаемости кровеносных сосудов. Биологическая роль сводится к обеспечению проникновения яда в ткани человека с последующей резорбцией в кровь Ускоряет рассасывание гематом, спаек, рубцов, восстанавливает проходимость фаллопиевых труб. Свойство энзима имеет положительное значение в случае применения в виде накожных мазей и линиментов Выраженные антигенные и аллергенные свойства Специфический нейромедиатор для дофаминовых рецепторов, стимулирует α- и β- адренорецепторы, увеличивает сердечный выброс Вызывает небольшое изменение артериального давления, а также силы и частоты сердечных сокращений без увеличения общего периферического сопротивления. В отличие от адреналина и норадреналина, уменьшает почечный кровоток и диурез Содержится в организме в связанном виде. Освобождается при воспалительных и аллергических реакциях, анафилактическом шоке. Вызывает боль у млекопитающих и человека Гормональное действие, медиаторные функции. Вызывает расширение капилляров, увеличивает их проницаемость и сокращение гладкой мускулатуры Играет важную роль в развитии аллергических реакций В организме образуется из дофамина и является предшественником адреналина. Гормон мозгового слоя надпочечников человека Участвует в передаче нервных импульсов в периферических нервных окончаниях и синапсах центральной нервной системы, воздействует как α1-адреномиметик на адренергические рецепторы мышц кровеносных сосудов, вызывает их сужение, что приводит к повышению артериального давления

Название (действие)	Свойства
Мелиттин (снижает поверхностное натяжение клеток и их органелл)
МСД (пептид 401)
Адолапин
Секалин
Тертиапин
Протеазные ингибиторы
Кардиопеп
Фосфолипаза А2 (наиболее устойчивый энзим пчелиного яда)
Гиалуронидаза (гликопротеин), наиболее активный энзим мукопол и сахаридов
Дофамин (допамин)
Гистамин
Норадреналин

Мелиттин - пептидный компонент, имеющий характерную молекулярную структуру, сочетающую гидрофобные и гидрофильные свойства. Молекула мелиттина, благодаря поверхностно-активным свойствам, способна гидрофобной частью встраиваться в бислойные липидные структуры, что способствует их модификации и лизису с участием ферментов.

Мелиттин сочетает в себе свойства вещества с про- и противовоспалительным действием . Воспалительное действие (местная реакция) - это результат его прямого действия на проницаемость мембран, накопление биологически активных веществ и синтез простагландинов. Противовоспалительный эффект (системный) обеспечен АКТГ и проявляется при введении относительно высоких доз (0,05-2 мкг/мл). Токсические дозы (10мкг/мл и более) угнетают центральную нервную систему, дыхательный центр и выделение адреналина, повышают артериальное давление (за счет резкого увеличения концентрации глюкокортикостероидов), вызывают сердечную аритмию. Мелиттин - слабый антиген и аллерген, укрепляет лизосомные мембраны.

Апамин - низкомолекулярный пептид пчелиного яда, способный активно модифицировать ионные каналы клеточной мембраны, что сопровождается характерными изменениями функционального состояния клеток и органов.

МСД (пептид 401) , более сильный дегранулирующий и освобождающий гистамин агент. Если фосфолипаза и мелиттин освобождают биогенные амины из мастоцитов, повреждая клеточную мембрану и разрушая их органеллы, то действие МСД-пептида основано на другом механизме. Он принадлежит к группе специфических гистамин-выделителей. Основной эффект - способность вызывать дегрануляцию тучных клеток с выходом гистамина, серотонина и гепарина.

3 Химический состав пчелиного яда по книге Лудянского Э.А.

3.1 Состав пчелиного яда. Свойства компонентов пчелиного яда

Высокомолекулярные вещества состоят из фосфолипазы А и В, гиалуронидазы, кислой фосфатазы и других.

Гиалуронидаза - фермент, разрушающий полисахариды, входящие в состав соединительной ткани и клеточных мембран, термоустойчива, обладает аллергическими свойствами. Помогает увеличивать проходимость клеток и тканей. Активность фермента сглаживается гепарином и сывороткой крови. Сглаживает рубцовую ткань. Она расщепляет кровяные и тканевые структуры, повреждает мембраны митохондрий и блокирует проводимость структур нервной системы. Фосфолипаза А превращает фосфолипиды в токсические соединения (гемолитический яд), вследствие чего нарушает процессы тканевого дыхания, является наиболее активным антигеном и аллергеном. Фосфолипаза отщепляет лецитин и кефалин от фосфолипидов, что уменьшает поверхностное натяжение. Шаполини установил, что этот энзим (2% состава яда) состоит из 18 3 аминокислотных остатков, к которым примыкают сахара. Активизирование экзима происходит в присутствии хлорида натрия и железа.

Липофосфолипаза (фосфолипаза В) в свою очередь переводит токсичный лизолецитин в нетоксичные соединения, снижая тем самым активность фосфолипазы А (Ст. Шкендеров).

Кислая фосфатаза - сложный белок типа гликопротеинов, термоустойчива, нетоксична, совместно с альфа-глюкозидазой обеспечивает сверхчувствительность к пчелиному яду. Альфа-глюкозидаза с молекулярным весом 170000 чувствительна к высокой температуре, нетоксична.

В состав пчелиного яда входят 18 из 20 обязательных аминокислот (аланин, валин, гликокол, лейцин, изолейцин, серин, трионин, лизин, аргинин, глютаминовая и аспарагиновая кислота, триптофан, пролин, тирозин, цистин, метионин, фенилаланин, гистидин). Еще Парацельс писал, что эффект действия пчелиного яда зависит от дозы. Малые дозы яда, попадая в кровь, компенсируют дефицит аминокислот поэтому наилучший вариант апитерапии пчелоужаление. Метионин активизирует действие гормонов, витаминов, ферментов, снижает уровень холестерина. Гистидин положительно влияет на жировой обмен, улучшает состояние больного с атеросклерозом. К низкомолекулярным соединениям относятся пептиды. Эти химические соединения играют большую роль в человеческом организме, стимулируя различные биохимические процессы, участвуя в белковом, жировом, гормональном, минеральном, водном и других видах обменов. Они состоят из цепочки аминокислот, вырабатываются АПУД-клетками. По данным В.Е.Клуша (1987), Т.В.Докукиной с сотр. (1989) и других, пептиды усиливают активность клеток центральной нервной системы, более интенсивно проводятся импульсы по проводящим путям и периферической нервной системы. По мнению Б.Н.Орлова (1988) пептиды пчелиного яда обеспечивают его столь многостороннее действие.

Р.Д.Сейфулла с сотр.(1988) показали, что пептиды являются аналогами с антагонистами различных гипоталамических факторов. Ведущим пептидом в пчелинном яде является мелиттин (55%). (Нейман и Габерман 1952, Габерман 1964).

Меллиттин состоит из 26 аминокислот, стимулирует активность надпочечниково-гипофизарной системы, повышает уровень кортизола в плазме крови, иммуносупрессор, улучшает образование специфических антител, связывает и выводит продукты воспалительных реакций, малые дозы мелиттина увеличивают образование ЦАТФ в печени и стимулируют железы внутренней секреции, что уменьшает воспалительную реакцию. Меллитин действует антибактериально, особенно на граммположительные микробы. Шипмэн и Коул из Сан-Франциско в 1967г. установили радиопротекториое действия мелиттина. 60% мышей, которым предварительно вводились большие дозы яда и подвергшиеся затем интенсивному рентгеновскому излучению, остались живы. Б.Н.Орлов показал ганглиоблокирующее действие этого пептида.

Меллитин увеличивает сокращаемость мышц, снижает поверхностное натяжение растворов, опосредуя реакции через простагландины Е1 и Е2. Меллитин связывается элементами ретикуло-эндотелиальной ткани, поэтому подкожное введение яда более токсично чем внутривенное.

Ст. Шкендеров и Ц.Иванов (1985) обнаружили, что меллиттин ослабляет воспалительное действие лизосом, это несколько противоречит общепринятым данным о влиянии на воспаление меллиттина. Ими также выявлено стимулирующее действие пептида на функции костного мозга. Следует все же отметить, что исследователи работали с малыми разведениями мелиттина.

В 1937 г. Фельдберг и Келловэй установили, что пчелиный яд освобождает эндогенной гистамин. Н.В.Корнева показала, что под влиянием гистамина изменяется микроциркуляция и реактивность кожных капилляров. Мелиттин и фосфолипаза А влияют не только на эритроциты, но и лейкоциты.

Б.Н.Орлов с сотр. (1983) выявили, что внутривенное введение мелиттина в дозе 0,1-0,5 мг/кг снижает тонус сосудов большого круга кровообращения, увеличивается пульсовое наполнение сосудов мозга и конечностей, улучшается функциональное состояни миокарда. Малые дозы мелиттина уменьшали вязкость крови.

Апамии (2% состава пчелиного яда) состоит из 18 аминокислот с молекулярной массой 2036. Структура открыта параллельно Габерманом и Р.А.Шиполини в 1967 г.. В 1975 г. французские исследователи выделили чистый апамин Апамин состоит из 18 аминокислот, пептид имеет щелочной характер. Молекулярная масса 2036 (Ст. Шкендеров и Ц.Иванов, 1985).

Апамин вызывает повышенную двигательную активность. Благодаря малым размерам апамин легко проходит через гематоэнцефалический барьер. При введении в мозговые желудочки активность пептида увеличивается в 100-10000 раз. Апамин сильно возбуждает центральную и периферическую нервную систему, систему коры надпочечников - гипофиз (повышение уровня адреналина, кортизола, артериального давления). Он стимулятор ретикуло-лимбических структур. (Ст. Шкендеров). Апамин предохраняет сывороточные белки от денатурации в чем значительно сильнее нестероидной группы. Он угнетает серотониновое воспаление, гистаглобин и активность сывороточного комплемекта, что влияет на иммунные процессы. Пептид не вызывает аллергии, обеспечивает противовоспалительное действие (Р.Овчаров с сотр. 1983).

Апамин увеличивает проницаемость гематоэнцефалического барьера. Малые количества пептида возбуждают нервную систему (У.Шпорри и М.Йентш, 1973) повышают двигательную активность, стимулируют образование биогенных аминов(норадреналин, серотонин, дофамин). Апамин блокирует воспалительную реакцию от внешнего воздействия, защищает сывороточные белки от денатурации, действует по типу нестероидных противовоспалительных средств. Это обусловлено протеазами, которые угнетают действие трипсина, тромбина, папаина. Действие его подобно тразилолу. Этот пептид стимулирует клетки, вырабатывающие антитела (Ст.Шкендеров) усиливает иммунокомпетентные клетки. Апамин угнетает тормозящие процессы в центральной нервной системе, стимулирует мезенцефальную и гипоталамическую зоны мозга.

Г.Вайсман (1973) показал, что экспериментальный артрит излечивается только за счет апамина. Р.Овчаров с сотр. (1976) установили, что апамин угнетает действие серотонина, мукопротеидов, гаптаглобина, что объясняет его противовоспалительный эффект.

МСД-пептид (пептид 401) был выделен Брейтхауптом и Габерманом в 1968 году, состоит из 22 аминокислот с молекулярной массой 2588, имеет щелочной характер. Этот пептид освобождает эндогенный гистамин из тучных клеток, блокируется папаверином. МСД-пептид увеличивается проницаемость капилляров и вызывает местный отек. Как и апамин, раздражает нервную систему, обладает противовоспалительным действием (в 1000 раз сильнее гидрокортизона). При внутривенном введении блокирует любое экспериментальное воспаление. Это ведущий противовоспалительный пептид пчелиного яда (Биллингэм), стабилизирует функцию эндотелия кровеносных сосудов, который становится нечувствительным к воспалению. Ведущий механизм противоболевой, действует по типу индометацина. Угнетается активность ферментов, обеспечивающих воспалительные реакции (циклооксигеназы и липооксигеназы) за счет приостановления выделения простагландинов, и гемотоксического действия. Обладает антиаггрегантным действием. Терапевтический индекс этого вещества от 5000 до 7000, тогда как традиционных аналгетиков 30-50. Опиатное число 80, т.е. в 80 раз сильнее опия. Адолапин - первый экзогенный пептид, действующий по типу эндорфинов на все анализирующие системы головного мозга. Белковые ингибиторы - пептиды, влияющие на трипсин и другие протеазы, образующиеся за доли секунд, освобождая гистамин.

В лаборатории акад. ЮА.Овчинникова (1980) был выделен низкомолекулярный компонент - тертиапин, обладавший пресинаптическим действием.

В 1971 г. выделен пептид из пчелиного яда, обуславливающий анабиоз плодовых мушек, замедление их роста.

В 1976 г. были получены мелиттии Р и секапин снижающие температуру тела и успокаивающие центральную нервную систему.

Дж.Сейн (1983) сообщил о выделении пептида кардиопеп с антиаритмическим действием по типу бета-блокирующего адренолитика.

В пчелином яде выделены неорганические кислоты: муравьиная, соляная, ортофосфорная и ацетилхолин, которые обеспечивает ощущение жжения при ужалении. Н.П.Йориш (1978) показал, что ацетилхолин пчелиного яда помогает при лечении параличей. П.Починкова с сотр. (1971) установили, что пчелиный яд, введенный ультразвуком, угнетает холинэстеразу.

Яд содержит микроэлементы: фосфор, медь, кальций, магний, по количеству их меньше чем в меде.

Ученые из Университета Вашингтона (США) сообщили, что содержащийся в пчелином яде токсин мелиттин уничтожает вирус иммунодефицита человека (ВИЧ – вирус, вызывающий СПИД), оставляя невредимыми окружающие здоровые клетки. Они утверждают, что их открытие является одним из важнейших шагов к созданию вагинального геля, предотвращающего распространение ВИЧ. Преподаватель медицины доктор Джошуа Худ сказал: «Мы надеемся, что в тех местах, где ВИЧ наиболее распространен, люди вскоре смогут использовать этот гель в качестве превентивной меры, предупреждающей дальнейшее распространение инфекции».

Мелиттин – мощный токсин, входящий в состав пчелиного яда. Он способен пробить брешь в защитной оболочке ВИЧ, а также воздействовать на другие вредоносные вирусы. Наночастицы мелиттина обладают противораковыми свойствами и способны уничтожать опухолевые клетки. В противоопухолевой терапии пчелиный яд применяется не впервые. В 2004 году хорватские ученые сообщили в журнале «Journal of the Science of Food and Agriculture» («Наука питания и сельского хозяйства»), что пчелопродукты, в том числе пчелиный яд, можно с успехом использовать для лечения и профилактики рака. Они также доказали, что нормальные, здоровые клетки остаются при этом незатронутыми. Большинство препаратов против ВИЧ направлены на ингибирование (препятствование) активности вируса, а наночастицы мелиттина атакуют его жизненно важные структуры.

Доктор Худ объяснил это так: «Атаки мелиттина направлены на физическую структуру ВИЧ. Теоретически у вируса нет никакой возможности адаптироваться к такому воздействию. Для этого у него должно быть защитное покрытие в виде двухслойной мембраны». Худ считает, что мелиттин можно применять в двух видах терапии – в предотвращении распространения ВИЧ-инфекции (вагинальный гель) и для того, чтобы противодействовать уже существующей инфекции, в том числе ее лекарственно-устойчивым видам.

Теоретически наночастицы мелиттина, попадая в кровь пациента, очищают ее от ВИЧ-инфекции. По словам доктора Худа, «Те частицы, которые мы используем в своих экспериментах, были разработаны много лет назад как искусственный продукт крови. Они не способствуют доставке кислорода, но, тем не менее, циркулируют в организме благополучно и представляют собой надежную платформу, на основе которой организм может адаптироваться к различным видам инфекций». Мелиттин атакует двухслойные защитные мембраны без разбора, что позволяет использовать его в лекарственной терапии при ВИЧ-инфекциях, гепатитах В и С, а также в качестве противозачаточного препарата.

Данное исследование, однако, не рассматривает мелиттин как средство контрацепции. Тем не менее, доктор Худ заявил: «Мы изучаем возможность применения мелиттина партнерами, желающими завести ребенка, в тех случаях, когда ВИЧ диагностирован только у одного из них. Сами частицы являются совершенно безопасными для спермы, а также для вагинальных клеток». Данное исследование было проведено в лабораторных условиях на животных. Но, поскольку наночастицы мелиттина, как выяснилось, не вредят человеческому организму, в ближайшее время их вполне можно будет использовать и в исследованиях с участием человека.

Christian Nordqvist, Medical News Today