проводимый с помощью специфических тестов? К таким исследованиям относят ИФА, РИФ, РИБТ, и иммуноблотинг. В ходе проведения этих серореакций происходит связывание комплекса «антиген-антитело» с участием трепонемных антигенов.

Трепонемные тесты становятся информативными чуть позже нетрепонемных – спустя 15-30 дней после попадания возбудителя в организм. ИФА и РИФ относят к высокоточным и специфичным методам иммунодиагностики сифилиса. В ходе исследования происходит связывание антитрепонемных антител с антигеном. Через 10-14 дней после инфицирования в сыворотке крови начинают появляться иммуноглобулины IgM, через 25-30 – IgG.

РПГА можно использовать через 30 дней после заражения. Как правило, ее применяют в сочетании с реакцией микропреципитации и . Ее применение позволяет подтверждать сифилитическую инфекцию на любой ее стадии. Нарастание титров означает активацию возбудителя и рецидивирование инфекции, при латентном течении показатели титров снижаются. У людей, даже прошедших терапию и излечившихся от сифилиса, результаты РПГА остаются положительными в течение всей жизни.

Реакция иммобилизации РИБТ – наиболее точный метод сероисследования на сифилис. Она позволяет безошибочно дифференцировать ложноположительные результаты анализа от истинно положительных. Окончательно верифицировать диагноз при скрытом течении болезни, а также подтверждать или исключать заболевание у беременных при получении положительных результатов анализов.

Однако информативной она становится позже, чем другие стандартные иммунные реакции на сифилис.

При необходимости пройти диагностику сифилиса, обращайтесь к грамотным венерологам.

Болезнью, долгое время протекающей без симптомов, является сифилис. Патология, передающаяся половым путем, вызвана наличием бледной трепонемы. При исследовании путем взятия мазка выявить инфекцию невозможно, поэтому медицина предлагает иной способ нахождения сифилиса. Подходящей структурой исследования считается кровь. Чтобы проверить, сдается анализ крови на сифилис, забирая биологический материал, используя вены и пальцы. Сколько стоит, как называется анализ, какая требуется подготовка, а также другие материалы представлены в статье.

Инфекционная патология, не имеющая проявлений, может таиться внутри организма на протяжении длительного периода, постепенно разрушая и поражая ткани, как, например, гепатит. Людям, проходящим медицинские обследования обязательного характера, необходимо сделать проверку на наличие сифилиса. Важно узнать, есть ли у них гепатит, а также провести анализ крови на ВИЧ и сифилис. Исследования, включающие серологический анализ, проводятся независимо от очевидной или отсутствующей симптоматики. Используют, чтобы выявить гепатит. Показания к проверке:

• Если показало употребление пациентом наркотических средств;
• При сдаче донорской спермы, крови;
• Люди, находящиеся в местах лишения свободы;
• При наличии теста, подтверждающего присутствие бледной трепонемы;
• Когда пациент обнаружил симптомы, схожие с инфекционным заболеванием. Проявляется сыпью на половых органах;
• Когда осуществлялось одно или несколько совокуплений с зараженным сифилисом;
• Комиссия из врачей при поступлении на работу в следующие заведения: магазины, занимающиеся реализацией продуктов питания, кафетерии, рестораны, учреждения медицинской и детской тематики;

• Необходима серология девушкам, находящимся в положении. Девушки, у которых есть или был гепатит, знают о подобных проверках. Беременная сдает анализ трижды: когда становится на учет, на 30 неделе, перед отправкой в родильный дом;
• Когда больна мама грудничка. Сделают анализ, чтобы проверить на инфекционное заболевание;
• При увеличенных регионарных лимфатических узлах, долгосрочном периоде лихорадки неясного типа;
• Делают проверку прежде, чем госпитализировать пациента, исключая гепатит, сифилис и прочие заболевания;
• Когда назначено хирургическое вмешательство.

Процесс проведения сдачи

Для получения точного результата обращаются к квалифицированным специалистам. Ложноположительные и ложноотрицательные результаты случаются, хоть и не часто. Для отсутствия погрешностей в отчетах соблюдают свод правил:

• Как и многие другие, сдавать анализы нужно исключительно натощак;
• Рассказать лечащему врачу о том, прием каких лекарств осуществляется, особое внимание уделяя антибиотикам. Указать на прививки, сделанные в последнее время. Упомянуть о заболеваниях любого типа, беременности и прочем, относящемся к теме состояния организма;
• Курящим людям важно избегать курения хотя бы за 60 минут до тестирования;
• Не перетруждать организм, не употреблять алкогольные напитки, жирную пищу за пару дней до проверки.

Сказать точно, сколько делается анализ, невозможно. Данные и сроки зависят от используемой техники. Проводя общий анализ крови при сифилисе, имеет значение загруженность лабораторных сотрудников.

Разновидности тестов

Существует два типа:

• Специфический, дающий результат положительного типа даже в случае, когда заболевание уже вылечено;
• Неспецифический, проявляющийся при наличии патологии в данный момент.

Появление отрицательных данных в результатах неспецифического анализа является неким свидетельством крепкого организма.

Проверки специфические

• Иммуноблоттинг;
• Иммуноферментный анализ;
• РИФ (метод Кунса), еще называют реакцией иммунофлуоресценции;
• Реакция иммобилизации бледных трепонем;
• Реакция пассивной агглютинации.

Механизм работы специфических проверок заключается в том, что при воздействии на организм бактерий, вырабатываются антитела, атакующие в ответ опасные микроорганизмы. Образуются иммуноглобулины М спустя 14 дней после заражения. Благодаря им врачи узнают о том, что пациент совсем недавно заразился. Если не предпринимать никаких терапевтических методик, появившиеся тела сохраняются в организме долгие месяцы и даже годы. Появление иммуноглобулинов G свидетельствует о том, что с момента проникновения инфекции прошел месяц. Антитела могут находиться внутри на протяжении всего последующего жизненного срока.

Проверки неспецифические

• Микрореакция преципитации;
• Реакция Вассермана.

Проводят во время комплексных медицинских исследований на сифилис. Если организм поражен инфекцией, клетки массово гибнут, что приводит к ответной реакции. Начинается активная выработка особенного типа белков иммунной системой. При помощи теста выявляются белки, чью концентрацию можно исследовать и сделать подсчеты. После полного выздоровления пациента результаты выдают отрицательные показатели.

Расшифровка данных

Во время расшифровки анализа крови на сифилис применяют метод, имеющий название реакция Вассермана. Экспресс-диагностика, при которой результаты отрицательного характера не являются сто процентным показателем точности. Они будут ложноположительными, если пациент днем ранее употреблял жирную пищу, алкогольные напитки. Когда обнародован положительный результат, назначают второстепенный специфический тест. По интенсивности реакции медицинские работники определяют степень серьезности патологии.

При оценке результатов используют следующие обозначения:

• При слабоположительном – «+» или «++»;
• Для положительного – «+++»;
• При резко положительном – «++++»;
• Для отрицательного – «-».

Имеется патологический процесс, если в результате оценки полученного титра антител данные гласят о 1:2 до 1:800.

Микрореакция преципитации

Врачи все чаще предпочитают использовать данную методику, нежели предыдущую. При получении положительных данных велика вероятность проникновения бледной трепонемы в организм.

Результаты делятся на два типа:

• Отрицательный, указывающий на то, что человек здоров, либо сифилис находится в начальной стадии;
• Положительный, при котором вероятность болезни очень велика.

Если сдать анализ, не соблюдая правил, то полученные тесты нередко показывают ложноположительные данные.

Тест иммуноферментный

По общему мнению врачей самым перспективным и точным может называться данный тип анализа. Метод выявляет не только наличие патологии у пациента, но и указывает, если сифилис был перенесен и излечен в прошлом. Даже если пациент вылечился, тесты могут показывать положительные результаты. Антитела, образовавшиеся в организме, укажут на давность перенесенной болезни.

• Наличие иммуноглобулинов А свидетельствует о том, что человек заразился не более, чем 14 суток назад;
• При иммуноглобулинах А и М врачи узнают о недавнем заражении;
• Все разновидности иммуноглобулинов говорят о промежутке времени более, чем в месяц с момента попадания бледной трепонемы в организм;
• При иммуноглобулинах G можно судить, что патология излечена, была в прошлом.

Пассивная агглютинация

Указать на наличие болезни, либо перенесенную ранее форму сифилиса могут положительные данные теста. Чтобы сделать оценку полученного титра антител, исследуют данные о том, как давно был заражен пациент.

Иммунофлюоресценция

Отрицательные данные указывают на отсутствие антител, а, следовательно, человек не заражен. На наличие сифилиса указывает положительный результат. Определяется количеством плюсов или наличием минуса. Почти не встречается ложноположительный результат.

Иммуноблоттинговый метод

Если данные не внушают доверия, а также диагностика проводится у грудничка, то используют этот тип проверки. Услугу предлагают не все клиники по причине дороговизны исследования.

РИБТ

Когда прочие типы диагностики дают ложноположительные результаты, врачи прибегают к реакции иммобилизации бледной трепонемы. Несмотря на длительность получения результатов в 12 недель, это дольше предыдущих вариантов, тест дает почти сто процентную информацию, является чувствительным к инфекции.

Места сдачи тестов

Учреждения медицинского назначения предоставляют услугу. Речь идет о диагностических центрах, частных клиниках, поликлиниках, кожно-венерологических диспансерах. Тесты сдают бесплатно во всех государственных учреждениях.

Для точных данных кровь сдают натощак, используя локтевую вену. При положительных результатах не следует отчаиваться, современная медицина успешно борется с патологией. Если появились малейшие подозрения в заражении, следует незамедлительно обратиться у врачу, чтобы начать терапию без опасных последствий.

Одним из самых распространённых венерических заболеваний, на сегодняшний день, считается сифилис. Шанс заразиться при половом контакте с больным может составлять до 97%. Заразность этого заболевания во многом зависит от его стадии у больного. Первая стадия, при которой во рту , в прямой кишке и на половых органах образуются язвочки, богатые бледной трепонемой, считается наиболее опасной, а третья - наименее заразной.

Поэтому при первых же подозрениях на заражение спирохетами, следует обратиться к врачу, особенно, если на коже или слизистых появились высыпания или язвочки, спустя 3-4 недели после последнего полового акта. Если врач разделяет подозрения пациента, то он направляет его на сдачу анализа на сифилис .

Анализ на сифилис натощак может быть пробой крови по типу:

• Реакция связывания комплемента;
• Реакция пассивной гемагглютинации;
• Реакция иммобилизации бледных трепонем;
• Реакция иммунофлюоресценции.

Независимо от типа пробы крови, подготовка к анализу на сифилис будет включать в себя несколько пунктов, выполнить которые не составит труда. Итак, как берут анализ на сифилис? Поскольку в большинстве случаев о наличии бледной трепонемы в организме можно судить по пробе крови, то на момент сдачи необходимо сделать всё от себя возможное, чтобы ничего не могло повлиять на состав крови, исказив тем самым результат исследования и выдав ложноположительный или ложноотрицательный результат. Поэтому, хотя бы за 2 дня до сдачи крови на сифилис натощак, пациентам рекомендуют поберечь себя от излишних физических нагрузок, которые могут привести к выбросу в кровь излишнего количества различных гормонов, отказаться от приёма алкогольных напитков и жирной еды. Сбор крови делают утром натощак, поэтому перед анализом человеку рекомендуют не кушать хотя бы 8 часов, а утром ничего не пить, кроме воды. Чай, сок, кофе, сладкие воды употреблять не рекомендуют, чтобы не исказить результаты анализов. Также к подготовке взятия пробы на сифилис следует отказаться от курения хотя бы за 1 час до сдачи крови натощак.

Но, даже зная как делается анализ на сифилис, нужно учитывать, что он может делаться по-разному, в зависимости от того, что и каким способом исследуется. Так, пробу микрореакции преципитации делают из крови, взятой из пальца. При этом ищут специфические антитела, которые вырабатывает организм в ответ на повреждение клеток бледной трепонемой. Важным для получения правильного результата по микрореакции является не только осознанное поведение человека, у которого берут пробу, но и медработника, осуществляющего процедуру забора крови и её исследование. И если первый сделал всё от него зависящее, чтобы сбор натощак дал точный результат, то ошибки со стороны медработника могут всё равно показать как ложноположительный, так и ложноотрицательный результаты. К таким ошибкам относят:

• ошибки в процессе забора;
• исключение результатов контрольной проверки;
• использование плохо перемешанной эмульсии, вследствие чего концентрация антигена в ней будет неравномерна;
• использование эмульсии, подвергшейся бактериальному загрязнению;
• используют растворы, пластинки, пипетки или пробирки, не прошедшие необходимую стерильную обработку.

Помимо крови пробы на спирохету из пальца, иногда берут и другие анализы, в частности при отрицательных пробах крови, но при наличии, характерных для поражения бледной трепонемой симптомов у человека, берут спинномозговую жидкость на исследование. Подготовка к сбору спинномозговой жидкости несколько отличается, что необходимо для качественного исследования крови. Она включает в себя:

• Пояснение о том, для чего и сколько ликвора будет взято.
• Договорённость врача и пациента о месте и времени проведения пункции. Заранее должно быть обговорено, кто её берёт.
• Подготовка пациента к возможным болевым ощущениям в голове, возникающим в процессе исследования. Разъяснения о важности следования инструкциям врача для снижения её интенсивности.
• У пациента обязательно берут его письменное согласие на проведения процедуры, а при необходимости и согласие его родственников.
• Перед процедурой снимаются основные физические показатели человека для определения его нормального состояния после сбора спинномозговой жидкости.

А вот основное требование к

Анализ на сифилис назначается при наличии признаков, указывающих на возможность болезни, в профилактических целях (исследование проводится в рамках профосмотра медработников, работников детских учреждений и предприятий общественного питания, при госпитализации, оформлении в бассейн и т. д.), также его можно сдать по желанию, если есть подозрение на возможное инфицирование.

Сифилис – это хроническое системное инфекционное заболевание, возбудителем которого является бледная трепонема (Treponema pallidum).

Диагноз устанавливается на основании данных анамнеза, имеющихся клинических проявлений, результатов лабораторных исследований.

Врач, выписывающий направление, разъяснит, какие анализы сдать, что они показывают, через сколько по времени будет готов результат.

К основным лабораторным методам диагностики сифилиса относится ПЦР, а также серологические методы исследования: РМП, РИФ, ИФА, РПГА.

Показания к лабораторной диагностике сифилиса

Анализы на сифилис можно сдать анонимно, однако если есть необходимость в документе, удостоверяющем отсутствие сифилиса, рекомендуется проводить исследование под своим именем, так как анонимные результаты официальными учреждениями не принимаются.

Медицинскими показаниями к анализу на сифилис являются:

• наличие клинических признаков сифилиса (обнаружение генитальных язв, сифилидов и т. д.);
• тесный бытовой контакт или сексуальные связи с больным сифилисом;
• выявление у пациента других инфекций, передающихся половым путем;
• рождение ребенка от матери, больной сифилисом;
• планирование беременности;
• постановка на учет при беременности;
• обследование перед плановым оперативным вмешательством.

Подготовка к анализу, возможные ошибки, срок годности результата

Кровь для анализа на сифилис сдают утром натощак (пауза после приема пищи должна составлять 8–12 часов). Накануне исследования из рациона питания следует исключить жирную пищу, спиртные напитки. Перед сдачей анализа не рекомендуется курить. Перед забором крови на анализ допускается пить простую воду.

Ложноположительные результаты возможны при беременности, туберкулезе , сахарном диабете , онкологических заболеваниях , наркомании и алкоголизме , вирусных гепатитах , инфекционном мононуклеозе , после вакцинации.

Современным аналогом реакции Вассермана, которая широко использовалась для выявления сифилиса ранее, а сейчас признана устаревшей из-за частых ошибок, является антикардиолипиновый тест (RPR).

При получении отрицательного результата нельзя исключать ранний первичный и поздний третичный сифилис. При получении сомнительного результата исследование рекомендуется повторить через 10–14 дней. При обнаружении у пациента антител к бледной трепонеме рекомендуется проведение количественного исследования методом ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Срок годности результата анализа на сифилис зависит от цели, с которой проводилось исследование. Так, при исследовании в рамах регулярного профосмотра сотрудников результат исследования обычно действителен в течение года, для беременных – в течение одного триместра, для людей, относящихся к группе риска (например, инъекционных наркоманов или лиц, занятых в секс-индустрии) срок может быть меньшим.

Виды анализов на сифилис

Анализы на сифилис бывают двух видов.

1. Нетрепонемные. Эти тесты выявляют антитела к липидам и фосфолипидам из поврежденных клеток пациента. По этой причине положительный результат данных методов может быть обусловлен не только наличием сифилиса, но и других патологий. Нетрепонемные тесты обычно используются для скрининга, контроля проводимого лечения и излеченности, поскольку позволяют провести срочный анализ. При получении положительного результата нетрепонемного теста рекомендуется сдать развернутый анализ на сифилис. К ним относятся реакция Вассермана, антикардиолипиновый тест и пр.
2. Трепонемные. Эти тесты более точны, но и более сложны, поэтому их применяют для подтверждения положительного результата скрининг-тестов. Данные исследования имеют более низкий процент ложноположительных результатов. К трепонемным анализам относятся реакция пассивной гемагглютинации, иммуноферментный анализ (ИФА) , иммуноблотинг, реакция иммунофлюоресценции (РИФ), реакция иммобилизации.

Анализы на сифилис можно сдать анонимно, однако если есть необходимость в документе, удостоверяющем отсутствие сифилиса, рекомендуется проводить исследование под своим именем, так как анонимные результаты официальными учреждениями не принимаются.

Передача сифилиса с мочой не доказана, в слюне больного возбудитель выявляется К основным лабораторным методам диагностики сифилиса относится ПЦР, а также серологические методы исследования: РМП (реакция микропреципитации), РИФ, ИФА, РПГА (реакция прямой гемагглютинации). Помимо этого, может использоваться микроскопия, культуральная диагностика и пр.

Современным аналогом реакции Вассермана, которая широко использовалась для выявления сифилиса ранее, а сейчас признана устаревшей из-за частых ошибок, является антикардиолипиновый тест (RPR). Метод заключается в обнаружении антител класса IgG и IgM к высвобождаемому из поврежденных клеток пациента липоидному и липопротеиноподобному материалу. У больных первичным сифилисом антитела определяются в 70-80% случаев, у пациентов с вторичным или ранним латентным сифилисом – практически в 100% случаев. У 90-98% пациентов после проведенного лечения результаты антикардиолипинового теста становятся отрицательными. Так как данный тест не является специфичным, в некоторых случаях возможно получение ложноположительных результатов (например, при аутоиммунных заболеваниях).

Результаты лабораторного исследования обычно готовы на следующий рабочий день после сдачи крови (срок изготовления может варьировать в зависимости от используемых методов). В случае необходимости получения быстрого результата прибегают к экспресс-тестам.

Сифилис

Сифилис – хроническое венерическое заболевание, имеющее в своем течении три различающихся друг от друга этапа: первичный, вторичный и третичный. В настоящее время первичный и вторичный сифилис успешно лечатся, на стадии третичного в организме развиваются необратимые изменения.

Ложноположительные результаты анализа на сифилис возможны при беременности, туберкулезе, сахарном диабете, онкологических заболеваниях, наркомании и алкоголизме, вирусных гепатитах, инфекционном мононуклеозе, после вакцинации.

Пути передачи инфекции

Передается заболевание преимущественно половым путем, также возможно заражение через кровь (при переливании крови, у инъекционных наркоманов), бытовым путем (при использовании совместных бритв, зубных щеток, а также при использовании других общих предметов обихода с больным третичным сифилисом с открытыми сифилитическими язвами или гуммами), только при наличии твердого шанкра в ротовой полости. Возможно заражение ребенка на пренатальном этапе развития, при грудном вскармливании (даже при отсутствии видимых поражений молочной железы у матери). При трансплацентарной передаче инфекции от больной матери возможна гибель плода, преждевременные роды, рождение ребенка с врожденными пороками. В группе риска находится медицинский персонал, который может заразиться в ходе диагностических или лечебных мероприятий.

Первичный сифилис

В среднем инкубационный период сифилиса составляет три недели, на протяжении которых анализы могут показывать отрицательный результат даже при наличии заражения. По прошествии инкубационного периода в месте внедрения инфекционного агента возникает безболезненное изъязвление с плотным дном и приподнятыми краями, так называемый твердый шанкр (первичная сифилома). Помимо этого, развивается регионарный лимфаденит. Укорочение инкубационного периода, как правило, наблюдается в случае одновременного инфицирования человека из двух и более источников, удлинение – при приеме после заражения антибактериальных препаратов по другому поводу.

Продолжительность первичного сифилиса составляет 6-7 недель, он заканчивается самопроизвольным разрешением твердого шанкра и, если на данном этапе не проведено лечение, переходом его в другую стадию.

При получении сомнительного результата исследование рекомендуется повторить через 10–14 дней.

Вторичный сифилис

Начало данного этапа характеризуется возникновением на кожных покровах и слизистых оболочках пациента специфических высыпаний (розеолезных, пустулезных, папулезных), так называемых сифилидов. При вторичном сифилисе может наблюдаться очаговое выпадение волос, поражение нервной системы, повышение температуры тела до субфебрильных цифр, слабость, быстрая утомляемость, насморк, кашель, конъюнктивит . Высыпания исчезают через несколько недель, после чего заболевание переходит в латентную фазу, которая может длиться от нескольких месяцев до нескольких лет (в ряде случаев 10-20 лет и более). Во время скрытой фазы при ослаблении иммунитета больного возможны обострения. При неадекватной терапии или отсутствии лечения вторичного сифилиса болезнь переходит в стадию третичного сифилиса.

Третичный сифилис

На стадии третичного сифилиса происходит поражение всех органов и тканей. На кожных покровах, внутренних органах образуются сифилитические гуммы (узлы в тканях, которые необратимо разрушают их и разрешаются с формированием грубых рубцов). У пациентов с третичным сифилисом часто поражается нервная система (нейросифилис), наблюдаются парезы, параличи, ухудшение памяти, внимания, мышления. Обострения заболевания обычно связаны со снижением иммунитета у пациента. В отсутствие лечения на данной стадии заболевания у больного могут развиваться осложнения, возможен летальный исход.

Атипичный сифилис

В редких случаях нелеченные пациенты с вторичным сифилисом остаются бессимптомными носителями бледной трепонемы до конца жизни, при этом поражения, характерные для третичного сифилиса у них не развиваются.

При обнаружении у пациента антител к бледной трепонеме рекомендуется проведение количественного исследования методом ПЦР (полимеразной цепной реакции).

В ряде случаев отсутствуют и какие-либо проявления первичного сифилиса (например, при заражении человека во время переливания крови от инфицированного донора, то есть при попадании возбудителя непосредственно в кровь). Помимо этого, так бывает при локализации твердого шанкра в местах, где его трудно обнаружить (например, на шейке матки).

Врожденный сифилис

Клиническая картина врожденного сифилиса обусловлена действием бледной трепонемы на ткани формирующегося плода. Проявляется врожденной глухотой, гипоплазией зубов, паренхиматозным сифилитическим кератитом. Даже при уничтожении возбудителя в организме пациента с врожденной формой сифилиса дефекты, сформированные во внутриутробном периоде, остаются.

Видео с YouTube по теме статьи:

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — . При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после , через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления . Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, . Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с , в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации (МРП)

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

ПЦР на сифилис

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

Рис. 22. Выявление ДНК бледной трепонемы с применением ПЦР говорит либо о наличии жизнеспособных бактерий, либо об остатках погибших, но содержащих способных к образованию дополнительных копий отдельных участков хромосомной ДНК.